任何顆粒物進(jìn)進(jìn)液相色譜儀后都會(huì)在柱子進(jìn)口端被篩板擋住，zui后的結(jié)果是將柱子堵塞，表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此，要采取各種預(yù)防 措施，包括操縱步驟和商品儀器自身的各種過(guò)濾設(shè)計(jì)，努力防止或減少顆粒物進(jìn)進(jìn)液相色譜儀中，從而延長(zhǎng)儀器和色譜柱的使用壽命，并進(jìn)步數(shù)據(jù)的可靠性。
在液相色譜儀中，顆粒物的主要來(lái)源有三個(gè)途徑：活動(dòng)相、被測(cè)樣品和儀器系統(tǒng)部件的磨損物。
1、被測(cè)樣品
使用針筒式過(guò)濾器不可能100%得到通過(guò)過(guò)濾器的被測(cè)樣品，總會(huì)或多或少的丟失。丟失來(lái)自這樣幾方面：過(guò)濾器濾膜的吸附、過(guò)濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過(guò)濾器與針筒連接處的滲漏等。
2、活動(dòng)相
無(wú)論是液相色譜儀HPLC級(jí)的水還是在實(shí)驗(yàn)室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水，zui后一步也是通過(guò)0.2μm微孔濾 膜。任何一種緩沖液中加進(jìn)了固體物，必然活動(dòng)相過(guò)濾將。少量雜質(zhì)顆粒存在于活動(dòng)相中必然成為殘?jiān)?br />
解決辦法：2. 1.活動(dòng)相制備僅采用HPLC級(jí)液體時(shí)不需要過(guò)濾，反之所有活動(dòng)相組成在使用前必須過(guò)濾。
2.2在連接儲(chǔ)液瓶和泵的輸液管的末端進(jìn)口采用下沉式過(guò)濾器（常見(jiàn)材質(zhì)有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種）也是很重要的。這個(gè)過(guò)濾器的規(guī)格為≥10μm的微孔物質(zhì)，所以它不能取代活動(dòng)相過(guò)濾步驟，但是它能除往系統(tǒng)中的塵土并保證儲(chǔ)液瓶、輸液管使用的可靠性。
2.3.推薦在HPLC系統(tǒng)中采用一個(gè)0.45 或0.5μm的在線多孔過(guò)濾器，接在自動(dòng)進(jìn)樣器和柱子之間，即使已使用了保護(hù)柱。這個(gè)在線過(guò)濾器將成為擋板代替柱頭的濾板，而且如采用一個(gè)玻璃砂芯濾板， 既便宜，更換又方便（幾分鐘就可更換）。若采用在線過(guò)濾，液相色譜儀檢測(cè)每批樣品開始前記錄下壓力值，當(dāng)壓力上升一定值，例如25%或增加 500psi，應(yīng)該更換玻璃砂芯濾板了，更換以后沖洗幾分鐘系統(tǒng)將恢復(fù)到原來(lái)的壓力值。
3、儀器系統(tǒng)部件的磨損物
zui后，在液相色譜儀HPLC系統(tǒng)中顆粒物的另一個(gè)主要來(lái)源是輸液泵密封墊和進(jìn)樣閥旋轉(zhuǎn)軸的磨損。關(guān)于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。
3.1、在一般實(shí)驗(yàn)室中輸液泵密封墊通常使用壽命為六個(gè)月到一年，因此建議半年或一年更換這些密封墊。
3.2、原裝密封墊的密封效果，更換以后輕易引起活動(dòng)相滲漏。所以，只要不漏液就不要輕易更換密封墊。
在線咨詢