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紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)常見(jiàn)問(wèn)題解答
更新時(shí)間:2016-01-06   點(diǎn)擊次數(shù):6093次

一、光源部分:

    (1)鎢燈不亮;

原因:1.鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率zui高);

檢查:鎢燈兩端有工作電壓,但燈不亮;取下鎢燈用萬(wàn)用表電阻檔檢測(cè)。

解決方法:更換新鎢燈;

原因2. 沒(méi)有點(diǎn)燈電壓;

檢查: 保險(xiǎn)絲被熔斷;

解決方法:更換保險(xiǎn)絲,(如更換后再次燒斷則要檢查供電電路);

   (2)氘燈不亮;

    原因:1氘燈壽命到期(此種原因幾率zui高);

    檢查:燈絲電壓、陽(yáng)極電壓均有,燈絲也可能未斷(可看到燈絲發(fā)紅);

    解決辦法:更換氘燈;

    原因:2.氘燈起輝電路故障;

    檢查:氘燈在起輝的過(guò)程中,一般是燈絲先要預(yù)熱數(shù)秒鐘,然后燈的陽(yáng)極與陰極間才可起輝放電,如果燈在起輝的開(kāi)始瞬間燈內(nèi)閃動(dòng)一下或連續(xù)閃動(dòng),并且更換新的氘燈后依然如此,有可能是起輝電路有故障,燈電流調(diào)整用的大功率晶體管損壞的幾率zui大。

    解決辦法:需要專業(yè)人士修理;

    二.信號(hào)部分:

    (1)沒(méi)有任何檢測(cè)信號(hào)輸出;

    原因:沒(méi)有任何光束照射到樣品室內(nèi);

    檢查:將波長(zhǎng)設(shè)定為530nm,狹縫盡量開(kāi)到zui寬檔位,在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有無(wú)綠光斑影像;

    解決辦法:檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位?雙光束儀器的切光電機(jī)是否轉(zhuǎn)動(dòng)了(耳朵可以聽(tīng)見(jiàn)電機(jī)轉(zhuǎn)動(dòng)的聲音)?

    (2)樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下,全波長(zhǎng)范圍內(nèi)基線噪聲大;

    原因:光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品;

    檢查:觀察光源是否照射到入射狹縫的中央?石英窗上有無(wú)污染物?

    解決辦法:重新調(diào)整光源鏡的位置,用乙醇清洗石英窗;

    (3)樣品室內(nèi)無(wú)任何物品的情況下,僅僅是紫外區(qū)的基線噪聲大;

    原因:氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物;

    檢查:可見(jiàn)區(qū)的基線較為平坦,斷電后打開(kāi)儀器的單色器及上蓋,肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面;如果光學(xué)系統(tǒng)正常,zui大的可能是氘燈老化,可以通過(guò)能量檢查或更換新燈方法加以判斷;

    解決辦法:更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意:此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗(yàn)者來(lái)實(shí)施);

    (4)樣品室放入空白后做基線記憶,噪聲較大,紫外區(qū)尤甚;

    原因:比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對(duì)紫外光譜的吸收太強(qiáng)烈,使放大器超出了校正范圍;

    檢查:將波長(zhǎng)設(shè)定為250nm,先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零,然后將空比色皿插入樣品道一側(cè),此時(shí)吸光值應(yīng)小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大小;

    解決辦法:清洗比色皿,更換空白溶液;

    (5)吸光值結(jié)果出現(xiàn)負(fù)值(zui常見(jiàn));

    原因:沒(méi)做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液;

    檢查:將參比液與樣品液調(diào)換位置便知;

    解決辦法:做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液;

    (6)樣品信號(hào)重現(xiàn)性不良;

    原因:排除儀器本身的原因外,zui大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡(jiǎn)易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時(shí)重復(fù)推拉不在同一個(gè)位置上;

    檢查:更換一種穩(wěn)定的試樣判定;

    解決辦法:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;

    (7)做基線掃描或樣品掃描時(shí),基線或信號(hào)有一個(gè)大的負(fù)脈沖;

    原因:掃描速度設(shè)置得過(guò)快,信號(hào)在讀取時(shí),誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號(hào)讀取了;

    檢查:改變掃描速度;

    (8)做基線掃描或樣品掃描時(shí),基線或信號(hào)有一個(gè)長(zhǎng)時(shí)間段的負(fù)值或滿屏大噪聲;

    原因:濾光片飼服電機(jī)“失步”,造成檔位錯(cuò)位,國(guó)產(chǎn)電機(jī)尤甚;

    檢查:重新開(kāi)機(jī)有可能回復(fù),或打開(kāi)單色器對(duì)照波長(zhǎng)與濾光片的相對(duì)位置來(lái)檢查(注意:打開(kāi)單色器時(shí)要保護(hù)檢測(cè)器不被強(qiáng)光刺激);

    解決辦法:更換飼服電機(jī);

    (9)樣品出峰位置不對(duì);

    原因:波長(zhǎng)傳動(dòng)機(jī)構(gòu)產(chǎn)生位移;

    檢查:通過(guò)氘燈的656.1nm的特征譜線來(lái)判斷波長(zhǎng)是否準(zhǔn)確;

    解決辦法:對(duì)于儀器而言處理手段相對(duì)簡(jiǎn)單,使用儀器固有的自動(dòng)校正功能即可;而對(duì)于相對(duì)簡(jiǎn)單的儀器,這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來(lái)進(jìn)行了;

    (10)信號(hào)的分辨率不夠,具體表現(xiàn)是:本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無(wú)法觀察到;

    原因:狹縫設(shè)置過(guò)窄而掃描速度過(guò)快,造成檢測(cè)器響應(yīng)速度跟不上,從而失去應(yīng)測(cè)到的信號(hào);按常理,一定的狹縫寬度要對(duì)應(yīng)一定范圍的掃描速度;或者狹縫設(shè)置得過(guò)寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了。

    檢查:放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄;

    解決辦法:將掃描速度、狹縫寬窄、時(shí)間常數(shù)三者擬合成一個(gè)*化的條件;

    (11)當(dāng)儀器波長(zhǎng)固定在某個(gè)波長(zhǎng)下時(shí),吸光值信號(hào)上下擺動(dòng),特別是測(cè)量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開(kāi)關(guān)式的簡(jiǎn)易儀器;

    原因:開(kāi)關(guān)觸點(diǎn)因長(zhǎng)期氧化所致造成接觸不良;

    檢查:用手加重力量按琴鍵時(shí),吸光值隨之變化;

    解決辦法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點(diǎn)即可;

    (12)儀器零點(diǎn)飄忽不定,主要反映在簡(jiǎn)易儀器上;

    原因:在簡(jiǎn)易儀器中,零點(diǎn)往往是通過(guò)電位器來(lái)調(diào)整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良;

    解決辦法:更換電位器;

還有一點(diǎn)補(bǔ)充一下,如果是PC連接UV時(shí),同志們一定注意接口板別不小心被擊穿,一定要關(guān)機(jī)后拔插.若可見(jiàn)部分穩(wěn)定性不好,有可能是鎢燈的供電電壓不穩(wěn),一般鎢燈電源是穩(wěn)壓電路

(13)在使用過(guò)程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時(shí)伴有圖線記錄基線位置偏高。
    可能原因:
        ①光電倍增等老化,性能降低;
        ②信號(hào)處理板可能發(fā)生故障;
        ③前置放大版出現(xiàn)故障,引起反饋量增大。
解決辦法:
    ①開(kāi)機(jī)通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照,找出異同點(diǎn),并作一下定性定能分析。然后用一只同型號(hào)規(guī)格的新光電倍增管替換機(jī)上的光電管,再開(kāi)機(jī)實(shí)驗(yàn),結(jié)果記錄出來(lái)的圖線并沒(méi)有什么變化,由此證明光電倍增管沒(méi)有老化變質(zhì)。
    ②進(jìn)一步檢查信號(hào)處理板,未發(fā)現(xiàn)信號(hào)處理板各元器件損壞,對(duì)影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測(cè),結(jié)果測(cè)得數(shù)據(jù)正常,這說(shuō)明信號(hào)處理板*。
    ③由 于對(duì)以上分析,故障發(fā)生在前置級(jí)放大板可能性很大。應(yīng)采用模擬測(cè)試對(duì)前置放大板進(jìn)行測(cè)量,先利用直流穩(wěn)壓電源,把各供電電源加上,使其電路單工作,用信 號(hào)發(fā)生器發(fā)出的信號(hào)加到輸入端。再用示波器接在輸出端測(cè)量輸出信號(hào),將輸入信號(hào)與輸出信號(hào)對(duì)比,結(jié)果波形相同,說(shuō)明電路*。用相同方法對(duì)一個(gè)帶驅(qū)動(dòng) 器的開(kāi)關(guān)管測(cè)量,輸入端加入信號(hào)后,用示波器未能測(cè)出輸出端信號(hào),判斷開(kāi)關(guān)管壞,換上同一型號(hào)規(guī)格的開(kāi)關(guān)管,恢復(fù)正常。

(14)儀器掃描樣品時(shí),顯示一條直線。
    可能原因:軟件出現(xiàn)故障。
    解決辦法:退出操作系統(tǒng),重新啟動(dòng)計(jì)算機(jī),再次掃描。

(15)
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)接通電源后,光源不亮。
    可能原因:
    ①光源燈泡已損壞;
    ②保險(xiǎn)管燒壞。
    解決辦法:更換氘燈或鎢燈;更換保險(xiǎn)管。

(16)儀器自檢時(shí)提示通訊錯(cuò)誤。
    可能原因:儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒(méi)有連接好。
    解決辦法:連接好數(shù)據(jù)線,重新打開(kāi)儀器和軟件,重新自檢。

(17)自檢時(shí)提示波長(zhǎng)自檢出錯(cuò)。
    可能原因:自檢過(guò)程中可能打開(kāi)過(guò)儀器樣品室的蓋子。
    解決辦法:關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。

(18)測(cè)試過(guò)程中提示能量太低。
    可能原因:
      ①光源燈泡使用時(shí)間超過(guò)壽命期;
      ②樣池中有不透光的東西擋住了光。
    解決辦法:更換光源燈泡;拿走擋光的物品

三、使用技巧

(1)不使用氘燈時(shí)如何關(guān)閉氘燈

 

當(dāng)連接儀器時(shí),選擇儀器>配置>保養(yǎng)標(biāo)簽,然后點(diǎn)擊氘燈邊上的燈狀態(tài)框,除去復(fù)選標(biāo)記。只要掃描范圍和固定波長(zhǎng)測(cè)定不在氘燈的范圍之內(nèi)時(shí),氘燈將處于關(guān)閉狀態(tài)。

 

(2)如何決定所用的通帶

 

選擇測(cè)定光譜中zui窄峰的半高度,然后除以10。例如峰的半高度寬是20nm,通帶的優(yōu)選值是2nm。

 

(3)初始化剛完成,使用哪條基線
使用zui后一次存儲(chǔ)的基線。儀器在初始化時(shí)不進(jìn)行基線校正。可掃描一次零線,看基線是否完好,如果可以,就使用存在的基線。儀器在出廠時(shí)存儲(chǔ)有基線。如果未進(jìn)行過(guò)基線校正,則使用的是出廠時(shí)的基線。

 

(4)如果發(fā)生通訊故障,應(yīng)該檢查哪些項(xiàng)目
 

①檢查在儀器配置屏幕(選擇儀器>配置)中是否選擇了合適的通訊口;
②檢查電纜是否正確,牢固地連接
③檢查儀器的電源是否已經(jīng)打開(kāi)

 

(5)燈是如何進(jìn)行準(zhǔn)直的

 

實(shí)際上燈并不移動(dòng)。在初始化時(shí),驅(qū)動(dòng)燈反光鏡的步進(jìn)馬達(dá)連接有傳感器,當(dāng)檢測(cè)器發(fā)現(xiàn)能量zui大時(shí),反饋信號(hào)到燈室,步進(jìn)馬達(dá)的傳感器自動(dòng)記憶此時(shí)的反光鏡位置。當(dāng)檢查所有的位置后,反光鏡自動(dòng)返回到記憶的位置。

 

(6)紫外區(qū)讀數(shù)漂移的原因

 

確認(rèn)氘燈是否點(diǎn)亮。氘燈的使用時(shí)間是否超過(guò)了預(yù)期的500h壽命,一旦超過(guò),光強(qiáng)減弱,也許需要更新。此外可檢查夾縫寬度的設(shè)置是否太小。

 

(7)執(zhí)行了自動(dòng)調(diào)零后儀器處于什么狀態(tài)

 

自動(dòng)調(diào)零把當(dāng)前固定波長(zhǎng)的光度讀數(shù)調(diào)節(jié)為0或者100%,取決于測(cè)定的方式。使用自動(dòng)調(diào)零減去了空白讀數(shù)。通常,在單個(gè)固定波長(zhǎng)測(cè)定時(shí)使用自動(dòng)調(diào)零,如果是多波長(zhǎng)測(cè)定,應(yīng)該執(zhí)行基線校正。

 

(8)為什么執(zhí)行自動(dòng)調(diào)零后光譜仍然沒(méi)有得到有效的校正

 

因?yàn)樽詣?dòng)調(diào)零只校正一個(gè)點(diǎn);要校正光譜范圍,需要進(jìn)行基線校正或精細(xì)的基線校正。精細(xì)的基線校正應(yīng)該定期進(jìn)行,一般每月一次,在樣品室中不必放任何容器。

 

(9)基線校正后儀器的狀態(tài)如何?

 

基線校使時(shí)儀器在制定得波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光譜讀數(shù)調(diào)整為零。

 

(10)為什么基線校正不能正常起作用
是否樣品室中放了樣品?基線校正時(shí)有三種選擇,可確保基線校正的正常。
①樣品室池架內(nèi)空置(空氣對(duì)空氣)。此時(shí)校正儀器的基線,特別適合精細(xì)的基線校正
②樣品池中放入溶劑,參比側(cè)空置
③樣品和參比池中都放入溶劑
需要確認(rèn)樣品室的門(mén)已經(jīng)關(guān)好。雜散光會(huì)影響基線的質(zhì)量。此外,在的波長(zhǎng)范圍內(nèi)溶劑和樣品池的材料匹配。

 

(11)夾縫寬改變以后情況如何
多數(shù)場(chǎng)合下(紫外/可見(jiàn)區(qū)),設(shè)置夾縫寬也等于設(shè)置了帶寬,換言之設(shè)置了光譜的分辨率。夾縫寬改變,改變了光束的集合尺寸。在使用微量池和流通池時(shí)就要權(quán)衡考慮,增加夾縫寬可增加光通量降低噪聲。但是,使用zui大的夾縫寬,噪聲是降低了,付出的代價(jià)是分辨率也隨之降低了。

 

(12)為什么有時(shí)在儀器初始化中會(huì)出現(xiàn)氘燈能量或波長(zhǎng)正確度故障
出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因可能如下。
①樣品盒參比池中有樣品池
②使用某些附件,如池定位裝置、抽吸單元等,沒(méi)有坐落在正確的位置上或未準(zhǔn)直。
③如果安裝了抽吸單元,流通池臟了、空了或沒(méi)有準(zhǔn)直。
④氘燈的使用時(shí)間接近或超過(guò)預(yù)期的500h壽命,燈的能量降低乃至不能通過(guò)能量檢查,并且由于噪聲增加,使波長(zhǎng)正確度的檢查也失敗。此時(shí),換新的燈一切問(wèn)題迎刃而解。

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